Les hydrocarbures aromatiques polycycliques, de la recherche à la prévention
Colloque international francophone
3 et 4 septembre 2008, Montréal, Québec
Cinétiques de formation et de réparation des adduits de l’ADN du benzo[a]pyrène
C. MARIE1,2†, A. MAITRE2, T. DOUKI1, M. GATEAU1†, A. TARANTINI2, P. GUIRAUD2, A. FAVIER1, J-L. RAVANAT1
1Laboratoire des Lésions des Acides Nucléiques, LCIB (UMR-E 3 CEA-UJF), DRFMC, CEA/Grenoble, 17 Avenue des Martyrs 38054 Grenoble Cedex 9, France. 2Médecine et Santé au Travail, EPSP-TIMC UMR 5525, Faculté de Médecine, Domaine de la Merci, 38700 La Tronche, France.
Les hydrocarbures aromatiques polycycliques sont des polluants ubiquitaires de l’environnement. Certains d’entre eux, comme le benzo[a]pyrène (BaP), sont cancérigènes du fait de leur capacité à générer des adduits de l’ADN. Afin de définir de potentiels biomarqueurs d’exposition au BaP, l’objectif de cette étude était d’identifier les adduits majoritairement formés dans des cellules humaines traitées au BaP. L’influence du métabolisme cellulaire sur la nature et la fréquence des adduits formés a été étudiée par l’utilisation d’une lignée de kératinocytes (HaCat) et d’une lignée d’hépatocytes (HepG2). La quantification des adduits de l’ADN a été réalisée par chromatographie liquide haute performance couplée à la spectrométrie de masse en mode tandem qui permet une détection sensible et spécifique des adduits du BaP potentiellement formés. Ces adduits comprennent deux adduits du 7,8-dihydroxy-9,10-époxy-7,8,9,10-tétrahydrobenzo[a]pyrène (BPDE) et cinq adduits du radical cation du BaP. Les résultats indiquent que l’incubation des cellules avec du BaP induit presque exclusivement la formation d’adduits stables du BPDE sur les bases puriques. La quantité d’adduits formés dans les hépatocytes est deux ordres de grandeur plus importante que celle dans les kératinocytes. De façon intéressante, les niveaux d’adduits formés dans les deux lignées cellulaires incubées avec du (±)-anti-BPDE sont équivalentes, ce qui indique que la différence observée en présence de BaP pourrait être due à différentes cinétiques de métabolisation. La cinétique de réparation des adduits du BPDE est similaire dans les deux lignées avec une demi-vie d’environ 20 h. Ces résultats confirment l’intérêt des adduits du BPDE en tant que biomarqueurs d’exposition au BaP.