HAP : Méthodes
d'échantillonnage et d'analyse en surveillance biologique de
l'exposition
C. CHAMPMARTIN1, F.
JEANDEL1, M. LAFONTAINE2, P. SIMON1
1Institut National
de Recherche et de Sécurité, Rue du Morvan, CS 60027
54519 VANDOEUVRE LES NANCY Cedex. 2
Hygiéniste industriel, 14 Grande Rue, 54360 VIGNEULLES, FRANCE
patrice.simon@inrs.fr |
Nombre de méthodes d'analyses de fluides biologiques
impliquent, lors du traitement des échantillons, la mise en œuvre de
techniques "off-line" d'extraction liquide-liquide ou solide-liquide
(SPE) induisant diverses opérations (élution, concentration, re-dissolution
des extraits, etc.) avec manipulation. En dépit d'une certaine
automatisation, ces techniques restent fastidieuses, coûteuses et
sources d'erreurs (pertes) et ne permettent qu'une purification toute
relative.
L'emploi de la chromatographie liquide multi-dimensionnelle séquencée
(commutation de colonnes) est un moyen de pallier ces inconvénients. Le
traitement et la purification des échantillons, réalisés "in situ" (ou
"on-line"), permettent d'accroître la sélectivité. L'introduction d'une
technique SPE de pré-concentration au niveau de l'injection peut
conduire à une amélioration notable des limites de détection.
Le laboratoire, rompu à cette technique, présente deux exemples types
d'application illustrant ces propriétés: l'un relatif au dosage urinaire
du 1-hydroxypyrène (1-OHP), l'autre à celui du 3-hydroxybenzo[a]pyrène
(3OHBaP). Après injection directe de l'urine hydrolysée, le traitement
en ligne et l'analyse sont effectués respectivement en moins 20 et 35
min. Les limites de détection (S/N = 3) ont été estimées à 5 ng/L pour
le 1-OHP (100 µL injectés) et 0,05 ng/L pour le 3-OHBaP (3 mL injectés).
Le problème de la stabilité des métabolites et notamment du 3-OHBaP, a
été résolu par le développement d'un système de piégeage, de transport
et de conservation des échantillons sur phase solide : UriprelÒ.
En fin de recueil, le dispositif, réduit à une simple cartouche (L = 5
cm d = 1 cm), permet de s'affranchir de la réfrigération et d'accroître
les délais d'acheminement et de stockage.
|