Les hydrocarbures aromatiques polycycliques, de la recherche à la prévention
Colloque international francophone
3 et 4 septembre 2008, Montréal, Québec
Evaluation des dommages de l’ADN par le test des comètes et l’HPLC couplée à la spectrométrie de masse dans les cellules HepG2 traitées par du BaP pur ou en mélange environnemental
A. TARANTINI 1,2, T. DOUKI 2, C. MARIE 1,2, J-L. RAVANAT2 , C. BADOUARD 1, A. MAÎTRE1
1Equipe EPSP, Environnement et prédiction de la santé des populations Laboratoire TIMC (UMR 5525) Faculté de Médecine, Domaine de la Merci, 38700 La Tronche, France ; 2 DSM/INaC/SCIB UMR-E 3 CEA-UJF/Laboratoire Lésions des Acides Nucléiques, CEA-Grenoble; 38054 Grenoble Cedex 9; France
Les Hydrocarbures aromatiques polycycliques (HAPs) sont des composés, parfois classés cancérogènes comme le benzo(a)pyrène (BaP), émis lors des processus de combustion incomplète de la matière organique. L’objectif de ce travail est d’évaluer le potentiel génotoxique de mélanges environnementaux par des tests in vitro sur cellules HepG2 (lignée d’hépatocytes humains) et voir s’il existe une potentialisation du BaP par les autres composants des mélanges. Les cassures de l’ADN sont quantifiées par le test des comètes. Le taux d'adduits à l’ADN du BPDE, métabolite principal du BaP, est mesuré par HPLC couplée à la spectrométrie de masse. Les résultats montrent que le traitement cellulaire par du BaP pur génère peu de cassures de l’ADN en dessous de 1 µM mais produit des adduits BPDE dès 0,25 µM. A forte concentration, le rapport entre quantités d'adduits et de cassures est de 90. A quantité de BaP équivalente, une plus grande formation de cassures de l’ADN est observée dans les cellules traitées par des extraits d’échantillons atmosphériques industriels et urbains. Le traitement par le mélange industriel augmente la quantité d’adduits BPDE à l’ADN de 30% alors que le traitement par le mélange urbain inhibe la quantité d’adduits de 90% par rapport au BaP pur. Pour infirmer ou valider l'hypothèse du rôle des autres HAPs, nous traitons des cellules avec du BaP en mélange artificiel avec chacun des 9 autres HAPs retrouvés dans les échantillons environnementaux. Des effets potentialisateurs ou inhibiteurs sont mis en évidence pour certains d'entre eux, principalement pour la formation des adduits.